慢性乙型病毒性肝炎新药口服HBV cccDNA抑制剂可以特异性降低HBV感染肝细胞中cccDNA的水平
口服HBV cccDNA抑制剂可以特异性降低HBV感染肝细胞中cccDNA的水平
编者按：在慢性乙型肝炎(CHB)患者中，受感染肝细胞中共价封闭环状DNA(cccDNA)的持续存在是现有疗法无法实现病毒根除的主要障碍。因此，迫切需要研发出一种能够清除胞内cccDNA的药物实现病毒的根除，从而治愈CHB患者。近日，JOH杂志刊发了一项最新的CHB新药研究成果——一种新型的口服小分子cccDNA抑制剂，它可以特异性降低HBV感染肝细胞中cccDNA的水平。
文章发表封图(DOI:https://doi.org/10.1016/j.jhep.2022.12.014)
细胞外HBV DNA是一种松弛环状的双链DNA(relaxed circularDNA，rcDNA)分子，其两条链均不是闭合的，其中负链较长。在HBV的复制过程中，病毒DNA进入宿主细胞核，在DNA聚合酶的作用下，两条链的缺口均被补齐，形成超螺旋的cccDNA。
cccDNA是HBV前基因组RNA复制的原始模板，虽然其含量较少，每个肝细胞内只有5～50个拷贝，但对HBV的复制以及感染状态的建立具有十分重要的意义，只有清除了细胞核内的cccDNA，才能彻底消除患者病毒携带状态。在感染期间，HBV cccDNA 在细胞核中积累，并作为稳定的附加体持续存在并充当病毒基因转录的模板。也就是说HBV以cccDNA为“模板”，生成了新的HBV。
目前在研的可降低cccDNA水平的药物，一种为反义寡核苷酸(ASO)，目前正在开发中，它们可能通过阻断核心产生和衣壳形成来减少 cccDNA。此外，ASO 还可以下调去唾液酸糖蛋白受体1(ASGPR1)，通过抑制HBV的肝内吞作用来阻断HBV复制。另一种为cccDNA形成和转录抑制剂，可以通过阻断其形成、表达或稳定性来抑制cccDNA。既往研究显示，两种二取代磺酰胺(DSS)类药物，CCC-0975和CCC-0346，可通过抑制rcDNA去蛋白化来抑制rcDNA形成 cccDNA;CCC-0975被证明可以减少cccDNA的生物合成。
研究方法
这项研究中，研究人员通过对HBV感染的原代人肝细胞(PHHs)进行表型分析，筛选出新的cccDNA抑制剂。使用HBVcircle小鼠模型和uPA-SCID人源化肝小鼠模型评估cccDNA抑制剂的抗HBV效力。
文章相关图表摘要(DOI:https://doi.org/10.1016/j.jhep.2022.12.014)
研究结果
体外实验结果表明，HBV感染PHH后两天开始ccc_R08治疗，细胞外HBV DNA、HBsAg和HBeAg水平均有显著降低，且呈剂量依赖性。更重要的是，ccc_R08可以特异性地降低cccDNA水平，而不明显影响线粒体DNA。安全性方面，ccc_R08在PHH或多个增殖细胞系中没有显示出显著的细胞毒性。
在接下来的动物模型试验中，研究人员采用含有替代cccDNA分子的HBVcircle模型小鼠，每天给予ccc_R08口服两次，结果显示，HBV DNA和抗原的血清水平均有显著降低，并且这些影响在非治疗随访期间仍可持续。此外，在随访结束时，ccc_r08处理的HBVcircle小鼠肝脏中的替代cccDNA分子水平降低到定量下限(lower limit of quantification，LLOQ)以下。
研究结论
cccDNA在HBV感染的肝细胞中的持续存在是CHB无法治愈的根本原因。该项研究结果表明，ccc_r08作为一种新型的小分子cccDNA抑制剂，可以特异性降低HBV感染肝细胞中cccDNA的水平。这为彻底治愈CHB患者提供了一种新的途径。
原文链接：Li Wang, Qihui Zhu, Jitao David Zhang, et al. Discovery of a first-in-class orally available HBV cccDNA inhibitor. JOH December 29, 2022. DOI:https://doi.org/10.1016/j.jhep.2022.12.014
内容来源:《国际肝病》编辑部